Reacció en cadena de la polimerasa, abreujat comPCRen anglès, és una tècnica de biologia molecular utilitzada per amplificar fragments específics d'ADN.Es pot considerar com una replicació especial de l'ADN fora del cos, que pot augmentar molt una quantitat molt petita d'ADN.Durant tot elPCRprocés de reacció, una classe de substàncies juga un paper vital: els enzims.
1. Taq DNA
En experiments en els primers dies dePCR, els científics van utilitzar l'ADN polimerasa I d'Escherichia coli, però hi ha un problema amb aquest enzim: ha de reposar un nou enzim cada vegada que es realitza un cicle, la qual cosa fa que els passos de l'operació siguin lleugerament complicats i sigui difícil d'amplificar completament automàticament.Aquest problema es va resoldre després que els científics aïllessin accidentalment la Taq DNA polimerasa de Thermus aquaticus l'any 1988. Des de llavors, l'amplificació automàtica de l'ADN s'ha convertit en una realitat.El descobriment d'aquest enzim també faPCRtecnologia una tecnologia convenient, pràctica i universal.Actualment, la Taq DNA polimerasa és la polimerasa més comuna en kits d'ADN.
2. PfuDNA
Com s'ha esmentat anteriorment, la Taq DNase té un gran error, de manera que els científics han modificat fins a cert punt la Taq DNA-polimerasa per tal d'evitar l'amplificació inespecífica a causa del desajust, donant lloc a resultats de proves inexactes.Però la modificació de l'ADN polimerasa Taq pot inhibir l'activitat de l'ADN polimerasa a temperatura ambient.La PfuDNA polimerasa pot compensar bé els inconvenients anteriors de la Taq DNA polimerasa, de manera que la reacció de PCR es pot dur a terme amb normalitat i la taxa d'èxit de l'amplificació del gen objectiu es pot millorar eficaçment.
3. Transcriptasa inversa
La transcriptasa inversa es va descobrir l'any 1970. Aquest enzim utilitza ARN com a plantilla, dNTP com a substrat, segueix el principi de l'aparellament de bases i sintetitza una cadena única d'ADN complementària a la plantilla d'ARN en la direcció 5′-3′.La transcriptasa inversa depèn principalment de l'activitat de l'ADN polimerasa de les plantilles d'ADN o ARN i, per tant, no té activitat exonucleasa 3'-5'.No obstant això, té activitat RNasa H, que limita fins a cert punt la durada de la síntesi de la transcriptasa inversa.A causa de la baixa fidelitat i termoestabilitat de la transcriptasa inversa salvatge, els científics també la van modificar.
PerPCRexperiments, els principals consumibles són: tub de PCR individual, tub de PCR de 4/8 tires, plaques de PCR.
El LabioConsumibles de PCRtenen el següentavantatges:
Plaques de PCR: Àmplia compatibilitat amb termocicladors;Alt contrast, fàcil identificació del pou;bé reflex de fluorescència; botransferència de calor;Inhibidors de DNasa, RNasa, ADN, PCR certificats i provat lliure de pirogens.
Tubs de PCR individuals: Resistent a l'evaporació; botransferència de calor;excel·lent claredat òptica; DNasa, RNasa, ADN, inhibidors de PCR certificats i sense pirogens provats.
Tubs de PCR de 4/8 tires: Parets ultra fines; alta claredat; bona reflexió de la fluorescència;es pot utilitzar a la indústria farmacèutica, la indústria alimentària i la biologia molecular; material PP verge d'alta qualitat; DNasa, RNasa, ADN, inhibidors de PCR certificats i provat sense pirogens.
Hora de publicació: Jun-09-2023