Un tub de centrífuga és un tub senzill que pot suportar una gran velocitat de rotació i pressió, com ara separar algunes mostres i separar sediments sobrenedants.El tub de centrífuga d'ultrafiltració té dues parts semblants al tub interior i al tub exterior.El tub interior és una membrana amb un pes molecular determinat.Durant la centrifugació a alta velocitat, aquells amb un pes molecular més petit es filtraran al tub inferior (és a dir, el tub exterior), i els que tinguin un pes molecular més gran quedaran atrapats al tub superior (és a dir, el tub interior).Aquest és el principi de la ultrafiltració i sovint s'utilitza per concentrar mostres.
Els tubs de centrífuga d'ultrafiltració normalment es poden utilitzar sense tractament previ, però per al processament de mostres de proteïnes, especialment per a solucions de proteïnes diluïdes (< 10 ug / ml), la taxa de recuperació de concentració amb membranes d'ultrafiltració sovint no és quantitativa.Tot i que els materials PES minimitzen l'adsorció inespecífica, algunes proteïnes, especialment quan estan diluïdes, poden tenir problemes.El grau d'unió inespecífica varia amb l'estructura de les proteïnes individuals.Les proteïnes que contenen dominis carregats o hidròfobs tenen més probabilitats d'unir-se de manera irreversible a diferents superfícies.El pretractament de passivació a la superfície del tub de centrífuga d'ultrafiltració pot reduir la pèrdua d'adsorció de proteïnes a la superfície de la membrana.En la majoria dels casos, el pretractament de la columna abans de concentrar la solució de proteïna diluïda pot millorar la taxa de recuperació, ja que la solució pot omplir els llocs d'adsorció de proteïnes en blanc exposats a la membrana i la superfície.El mètode de passivació consisteix a remullar prèviament la columna amb un volum més gran de solució de passivació durant més d'1 hora, rentar-la a fons amb aigua destil·lada i després centrifugar-la una vegada amb aigua destil·lada per eliminar completament la solució de passivació que pot quedar a la pel·lícula. .Aneu amb compte de no deixar assecar la pel·lícula després de la passivació.Si el voleu utilitzar més tard, heu d'afegir aigua destil·lada estèril per mantenir la pel·lícula humida.
Normalment, els tubs de centrífuga d'ultrafiltració no es poden esterilitzar i reutilitzar.Com que el preu d'un sol tub no és barat, moltes persones intenten reutilitzar-lo: l'experiència és netejar la superfície de la membrana amb aigua destil·lada moltes vegades i centrifugar-la una o dues vegades.El tub petit que es pot centrifugar a la inversa es pot submergir en aigua destil·lada i després centrifugar a la inversa durant més vegades, que serà millor.Es pot utilitzar per a la mateixa mostra repetidament, i es pot remullar en aigua destil·lada quan no s'utilitza, però s'ha d'evitar la contaminació bacteriana.No barregeu mostres diferents.Algunes persones diuen que remullar amb un 20% d'alcohol i 1n de NaOH (hidròxid de sodi) pot prevenir el creixement de bacteris i evitar l'assecat.Mentre la membrana d'ultrafiltració envaeix l'aigua, no es pot deixar assecar.Tanmateix, altres diuen que destruirà l'estructura de la membrana.En qualsevol cas, els fabricants generalment no admeten la reutilització.L'ús repetit bloquejarà la mida dels porus de la membrana del filtre i fins i tot provocarà fuites de líquid, que afectaran els resultats experimentals.
Hora de publicació: Set-05-2022